高腳蛛沒有毒，嚴格的說所有的蜘蛛都是有毒的，只是大多數蜘蛛的毒性都是微乎其微的。因為它就是靠毒汁來獵取獵物的，而且蜘蛛的毒大多是通過它的牙刺入獵物等的身體產生的。他們的毒液就是消化液，用來體外消化食物的就像口水所以所有蜘蛛都是有毒的。

只有兩個科的蜘蛛是無毒的。現存最原始的蜘蛛，中紡亞目下的節板蛛科和新蛛類中有篩器的圓網蛛嫵蛛科是沒有毒腺的，前者還沒進化出，后者毒腺退化消失。除這兩科外所有蜘蛛都有一對毒腺，也就是說是有毒性的。并且蜘蛛的色彩越是鮮艷，其毒性就越強。

真正的有毒蜘蛛有多少，尚無確切統計，世界上毒性較強的，有球蛛科的地中海黑寡婦蛛，甲蛛科的褐平甲蛛，天疣蛛科的澳大利亞漏斗蛛、櫛足蛛科的黑腹櫛足蛛、捕鳥蛛科的澳大利亞捕鳥蛛。線蛛屬，捕鳥蛛屬，咬傷的傷口較大而深，狼蛛屬，園蛛屬等咬傷則較輕。Phoneutria蛛的毒素很強，雌性蛛的毒性要比雄性蛛的毒性強得多，雄性蛛不會給人以致死量的毒素。由于蜘蛛的毒性很強，在巴西，地中海東部，南斯拉夫等國，見蜘蛛都生畏。

在飼養、操作和采毒過程中，有時難免被毒蜘蛛咬傷。穴居型蜘蛛毒液毒性的大小，隨種類、性別、個體大小和成熟程度以及季節的不同而有所差異。一般雌蛛比雄蛛的毒性要大些，而成熟蜘蛛又比幼蛛的毒性大些。從季節來看，剛出蟄的蜘蛛和孵化期間的雌蛛毒性最強。蜘蛛是以其頭胸部前端的一對螯肢進行攻擊的，毒液經由螯肢上螯牙的尖端小孔注入皮下，此時被咬處可看到兩個針眼口。